方法

原理

优点

缺点

液相分离法

一些去污剂，如Triton X-114，脱氧胆酸钠能够和内毒素的脂质部分结合，通过液相分离的方法萃取内毒素从而使后者有效地去除。

对内毒素的去除率高，且不影响有效成份的活性。该法简单高效、价格低廉、适合大规模应用，在我们日常的蛋白纯化中较为常用。

去内毒素后的样品会有微量去污剂的残留。

分子筛法

分子筛是利用凝胶的网状结构，根据分子大小进行分离的一种方法。由于蛋白质和内毒素的分子量有较大差别，因此利用分子筛可以有效去除内毒素。

去除效果明显

每次处理量小，处理时间较长。

离子交换色谱法

当溶液pH＞2时，内毒素带有负电荷。因此内毒素与阴离子交换介质Q或DEAE Sepharose Fast Flow有较强结合。柱上的内毒素可在洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或NaOH去除。

成本低，吸附容量大

但不适合于溶液中存在其它带负电荷物质的情况。

亲和色谱法

将适当的配基固载于色谱基质上合成出亲和介质，使它特异性结合内毒素。GenScript将多粘菌素B（PMB）偶联于Sepharose FF 上，以此介质特异性吸附内毒素。

高效能、高选择性

相对成本较高。

超滤法

由于内毒素具有较大的相对分子质量，因此可选用超滤膜去除溶液中的内毒素。

操作简单，处理量大

操作过程中的压力较高。 不适合含有较大相对分子质量成份的样品。因为在除去热原的同时会阻留或吸附样品中的有效成份，使产品收率大受影响。

吸附法

活性炭用于去除内毒素是由于内毒素的相对分子质量较大。适合于组分较为简单的小分子的溶液中或水中去除内毒素。活性炭常用量为0.1%～0.5%。

成本低，处理量大。

活性炭的选择性较差，易吸附有效成份，纯化后溶液中的残余活性炭不易去除，且自身可能含有的重金属造成样品污染，因此目前很少使用

蒸馏法

此方法可用于生产去热源水，作为注射用水或洗涤水。

去除效果明显

成本较高

疏水层析法

内毒素的脂肪A 部份有很强的疏水性, 但在高盐下会凝集, 无法挂上疏水层析柱。因此可选择能结合目标蛋白的疏水介质去除内毒素

适用于高盐浓度的样品

目前技术不够成熟，还需要进一步探索